| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-27页 |
| ·双链RNA病毒的分类 | 第8页 |
| ·呼肠孤病毒的生物学及分子生物学 | 第8-14页 |
| ·呼肠孤病毒的分类 | 第9-10页 |
| ·呼肠孤病毒的结构特点 | 第10-11页 |
| ·呼肠孤病毒的侵染循环(life cycles) | 第11-14页 |
| ·呼肠孤病毒种的分类依据 | 第14页 |
| ·植物呼肠孤病毒研究进展 | 第14-20页 |
| ·斐济病毒属 | 第14-16页 |
| ·植物呼肠孤病毒属 | 第16-18页 |
| ·稻病毒属 | 第18页 |
| ·MRDV、MRCV、RBSDV与玉米粗缩病 | 第18-20页 |
| ·dsRNA病毒反向遗传学研究进展 | 第20-25页 |
| ·噬菌体Φ6的反向遗传学 | 第20-23页 |
| ·IBDV和IPNV的反向遗传学 | 第23-24页 |
| ·Mammalian orthoreovirus的反向遗传学 | 第24-25页 |
| ·本论文研究的目的意义 | 第25-27页 |
| 第二章 RBSDV-Hbm基因组的结构与分子进化 | 第27-44页 |
| ·材料与方法 | 第27-32页 |
| ·材料 | 第27-28页 |
| ·病毒dsRNA的提取 | 第28-29页 |
| ·dsRNA的凝胶电泳检测 | 第29页 |
| ·RT-PCR | 第29-30页 |
| ·DNA片段超低温冻融法回收纯化 | 第30页 |
| ·连接 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第31页 |
| ·重组质粒的快速鉴定(Cracking) | 第31页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第31页 |
| ·酶切鉴定和PCR鉴定 | 第31页 |
| ·序列测定和分析 | 第31-32页 |
| ·结果与分析 | 第32-41页 |
| ·病毒dsRNA电泳分析鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第32-34页 |
| ·RBSDV-Hbm S1的序列分析 | 第34-38页 |
| ·RBSDV-Hbm S4的序列分析 | 第38-39页 |
| ·RBSDV-Hbm S5的序列分析 | 第39-40页 |
| ·RBSDV-Hbm S6的序列分析 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-44页 |
| 第三章 RBSDVP10蛋白原核表达及其抗血清的制备与应用 | 第44-54页 |
| ·材料与方法 | 第44-47页 |
| ·毒源 | 第44页 |
| ·酶和化学试剂 | 第44页 |
| ·菌种、载体和引物 | 第44-45页 |
| ·RBSDVP10蛋白原核表达载体的构建 | 第45页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及其检测 | 第45页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·抗血清的制备 | 第46页 |
| ·间接ELISA检测 | 第46页 |
| ·间接ELISA检测条件的优化 | 第46-47页 |
| ·Western blotting检测 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-53页 |
| ·P10原核表达载体的构建与鉴定 | 第47-48页 |
| ·P10原核表达产物的纯化 | 第48-49页 |
| ·间接ELISA检测 | 第49-52页 |
| ·P10抗血清Western blotting检测 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-54页 |
| 第四章 RBSDV侵染体系的建立 | 第54-64页 |
| ·材料与方法 | 第54-58页 |
| ·毒源、细胞、酶和抗血清 | 第54-55页 |
| ·小麦愈伤组织和悬浮细胞的培养 | 第55页 |
| ·水稻愈伤组织和悬浮细胞的培养 | 第55-56页 |
| ·小麦悬浮细胞的质壁分离和水稻原生质体的制备 | 第56-57页 |
| ·粗提纯的RBSDV病毒粒子直接接种水稻原生质体和小麦质壁分离的细胞 | 第57页 |
| ·粗提纯的RBSDV病毒粒子接种小麦悬浮细胞和小麦愈伤 | 第57页 |
| ·病毒RNA电击转染水稻原生质体 | 第57-58页 |
| ·接种后的样品检测 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·粗提纯的RBSDV病毒粒子接种质壁分离的小麦悬浮细胞和水稻原生质体 | 第58-60页 |
| ·粗提纯的RBSDV病毒粒子直接接种小麦愈伤和悬浮细胞 | 第60-61页 |
| ·病毒RNA转染水稻原生质体 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-64页 |
| 研究总结及展望 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
