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葡萄糖氧化酶基因转化小麦的研究

第一章 绪论第1-22页
   ·研究目的和意义第8-9页
   ·植物抗细菌和真菌病害基因工程研究概况第9-11页
     ·国外抗细菌、真菌病害基因工程进展第9-10页
     ·国内抗细菌、真菌病害基因工程回顾第10页
     ·植物抗病基因工程中存在的问题第10-11页
   ·葡萄糖氧化酶基因的抗病机制及其转化植物的研究进展第11-14页
     ·植物自身的抗病机制第11-12页
     ·活性氧的抗菌机制第12页
     ·葡萄糖氧化酶基因转化植物的研究第12-14页
   ·小麦遗传转化第14-20页
     ·小麦遗传转化研究现状第14-15页
     ·小麦基因工程的基本步骤第15-16页
     ·小麦遗传转化的主要方法第16-19页
     ·影响小麦遗传转化的因素第19页
     ·通过改进小麦转化体系避免外源基因沉默第19-20页
   ·转基因安全性问题第20-21页
   ·本研究技术路线第21-22页
第二章 实验材料和方法第22-32页
   ·实验材枓第22-23页
     ·小麦受体基因型筛选第22页
     ·小麦转化材料及分子检测所用试剂第22-23页
   ·实验方法第23-32页
     ·小麦受体基因型筛选第23页
     ·碱裂解法小量提取质粒DNA第23-24页
     ·酶切反应第24页
     ·DNA片段的回收与纯化第24-25页
     ·连接反应第25页
     ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态细胞第25-26页
     ·重组质粒向大肠杆菌的转化第26页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第26页
     ·基因枪法转化小麦的操作第26-27页
     ·小麦总DNA的提取第27-28页
     ·PCR检测第28页
     ·Southern blotting分析第28-30页
     ·淀粉-碘化钾染色第30-31页
     ·白粉病抗性鉴定第31-32页
第三章 结果与分析第32-48页
   ·优良小麦受体基因型筛选第32-36页
   ·植物表达载体构建和改造第36-38页
   ·再生植株获得第38-40页
   ·T_0代转GO基因植株的检测第40-41页
   ·T_1代植株GO基因的检测第41-42页
     ·T_1代植株PCR检测第41-42页
     ·T_1代植株Southern blotting分析第42页
   ·T_2代植株GO基因的检测第42-45页
     ·T_2代植株PCR检测第42-43页
     ·T_2代植株GO基因表达活性鉴定第43-44页
     ·T_2代植株白粉病抗性鉴定第44-45页
   ·T_3代植株GO基因表达活性鉴定第45-46页
   ·转基因植株中bar基因的检测第46-48页
     ·再生植株叶片涂抹除草剂鉴定第46页
     ·T_1代植株bar基因的PCR检测第46-48页
第四章 讨论与结论第48-51页
   ·讨论第48-50页
     ·适宜的受体基因型的重要性第48页
     ·转基因的遗传分离特性第48-49页
     ·T_2代转基因植株对白粉病的抗性分析第49页
     ·采用共转化法解决转基因小麦带来的环境安全性问题第49页
     ·转基因小麦产业化的可行性第49-50页
   ·结论第50-51页
参考文献第51-59页
附录第59-63页
致谢第63-64页
作者简历第64页

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